10 lời khuyên cho phân tích HPLC trong dược phẩm

Thứ năm - 28/05/2020 23:11
HPLC, còn được gọi là hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao, là một trong những phương pháp phân tích quan trọng nhất trong dược phẩm. Mục đích của HPLC là tách từng hợp chất tạo thành hỗn hợp.

Nó vượt qua dung môi lỏng có áp suất với việc sử dụng các bơm giữ hỗn hợp mẫu qua cột chứa đầy chất hấp phụ rắn. Có sự khác biệt về tốc độ dòng chảy cho từng thành phần do sự tương tác của các thành phần với chất hấp thụ làm cho các thành phần tách ra khi chúng chảy ra.
10 lời khuyên cho phân tích HPLC trong dược phẩm
HLPC được sử dụng trong ngành dược phẩm
Phương pháp phân tích này được sử dụng để kiểm tra và phát hiện các yếu tố hoặc thành phần thô được sử dụng trong sản xuất dược phẩm với việc sử dụng kỹ thuật phân tích định tính và định lượng. Điều cơ bản là bắt buộc rằng tất cả các công ty dược phẩm phải kiểm tra chất lượng thuốc trước khi bán loại thuốc đó.

Hệ thống sắc ký hiệu suất cao giúp hiểu rõ hơn, làm rõ và xác định số lượng tạp chất và các chất phân hủy trong khối lượng vật liệu và công thức thuốc.

Mẹo phân tích HPLC trong dược phẩm
1. Lựa chọn cột để phát triển kỹ thuật HPLC: Cách tiếp cận để chọn cột bên phải khác nhau. Cách tiếp cận bộ công cụ cung cấp một phạm vi xem xét hiệu quả và rộng về khả năng phân tách cho ứng dụng được điều tra. Sự tách biệt dưới sự phát triển được thúc đẩy bởi sự chọn lọc.

2. Hồ sơ của độ dốc, phụ gia, chất điều biến và bản chất của pha tĩnh là những phần cốt yếu của độ chọn lọc. Các đặc điểm và hỗ trợ của giai đoạn đứng yên điều khiển sự chọn lọc phải được xem xét.
3. Kỹ thuật đánh giá trực quan cho hiệu suất cột: Đầu tiên, bắt buộc phải biết một vài điều về các mối quan hệ chính trong sắc ký khi thiết kế một thí nghiệm. Bạn phải lấy công suất tối đa để tránh một vụ nổ.

4. Cách thiết lập đầu dò UV: Đầu dò UV thường được sử dụng trong phân tích HPLC, vì chúng được coi là dễ sử dụng và tạo ra dữ liệu hữu ích. Đôi khi,  UV có thể được yêu cầu thực hiện một nhiệm vụ bất thường để có được đường cơ sở tốt hơn, độ nhạy và khả năng tái tạo tốt hơn từ đầu dò (detector).

5. Loại và thể tích của Flow cell sẽ tác động đến độ nhạy của kỹ thuật và hiệu quả của các đỉnh. Đặt chiều rộng khe thành chiều rộng hẹp sẽ cải thiện độ phân giải của phổ, băng thông và tham chiếu. Điều quan trọng cần lưu ý là băng thông rộng có lợi thế giảm nhiễu bằng cách trung gian trên một diode có phạm vi lớn hơn.

6. Cách pha loãng mẫu ảnh hưởng đến HPLC: Các chất pha loãng mẫu được sử dụng để chuẩn bị mẫu HPLC có thể ảnh hưởng đến hình dạng cực đại và thời gian lưu của HPLC. Để hủy hiệu ứng quá tải, thể tích mẫu được bơm phải thấp hơn thể tích cực đại với khoảng 15%. Các giá trị của đỉnh và độ phân giải phải được lưu ý liên tục để đảm bảo không có hiệu ứng nào xảy ra.

7. Lựa chọn bộ đệm cho tách HPLC: Bộ đệm là một giải pháp chịu được sự khác biệt về độ pH. Nó là một dung dịch nước bao gồm trạng thái cân bằng của hỗn hợp axit yếu và bazơ mạnh hoặc ngược lại. Nhiều yếu tố ảnh hưởng đến việc lựa chọn bộ đệm; ví dụ là độ pH cần thiết của pha động hoặc độ bay hơi của bộ đệm. Nếu bộ đệm được chọn sai, nó sẽ được yêu cầu thêm vào ở nồng độ lớn hơn để hoạt động tốt. Điều này sẽ có xu hướng gây ra các vấn đề liên quan đến sự mạnh mẽ của kỹ thuật.

8. Đuôi đỉnh trong phân tích HPLC: Đây là một trong những biến dạng hình dạng đỉnh thông thường trong sắc ký. Khi độ bất đối xứng cao hơn 1,2, nó được gọi là đỉnh. Lý do chính cho việc cắt đuôi cực đại là do sự xuất hiện của nhiều phản ứng lưu giữ chất phân tích. Để tránh đuôi cực đại, đảm bảo hệ thống hoạt động ở độ pH thấp hơn sẽ làm giảm các tương tác thứ cấp khi thực hiện phân tách trong sắc ký.

9. Cách giải quyết các vấn đề về tính mạnh mẽ trong HPLC: Bắt buộc phải kiểm tra cấu hình độ dốc hoặc hệ thống dữ liệu để biết liệu độ dốc đã được nhập đúng chưa. Bất kỳ sự thay đổi nào trong khối lượng dwell gradient đều được quan tâm. Ngay sau khi kiểm tra xong, tìm ra thành phần rửa giải, điều này có thể được thực hiện bằng cách tạo một bộ mới của dung môi. Loại nồng độ chất điều chế hữu cơ đôi khi có ảnh hưởng đến kỹ thuật chọn lọc, để biết dung môi hữu cơ chính xác được áp dụng theo tỷ lệ hiện tại.

10. Thay đổi thời gian duy trì trong HPLC: Các pha di động được chuẩn bị sai để mang lại sự thay đổi nhanh chóng trong thời gian lưu. Vì vậy, đây là một vài lời khuyên về những gì nên làm và không nên làm.
Một pha di động đẳng cấp không nên được chuẩn bị trong một xi lanh đo, không áp dụng hữu cơ vào dung dịch nước để có thể tích. Một tỷ lệ dung môi sai sẽ được dẫn xuất.
Đảm bảo rằng bộ đệm phù hợp được sử dụng và độ pH chính xác.
Đảm bảo hiệu chuẩn pH chính xác.
Đối với các pha di động được trộn sẵn, không tách rời trong chân không.

Tổng số điểm của bài viết là: 0 trong 0 đánh giá

Click để đánh giá bài viết

  Ý kiến bạn đọc

Bạn đã không sử dụng Site, Bấm vào đây để duy trì trạng thái đăng nhập. Thời gian chờ: 60 giây