Phương pháp lập chương trình xét nghiệm Elisa bằng phần mềm GEN 5

1
C¸ch lËp c¸c thñ tôc
xÐt nghiÖm ELISA b»ng phÇn mÒm Gen 5
A. Thø tù lËp theo c¸c b­íc nh­ sau:
1. LËp quy tr×nh (hoÆc c¸c th«ng sè thùc hiÖn ®äc)
2. LËp b¶n ®Æt c¸c mÉu trong khay
3. LËp c¸c yªu cÇu vÒ rót gän sè liÖu
4. LËp c¸c yªu cÇu vÒ b¸o c¸o
B. C¸ch lËp:
1. X¸c ®Þnh quy tr×nh
1. Chän File>New Protocol
2. KÝch ®óp vµo Procedure
3. KÝch vµo Read
4. KÝch vµo c¸c hép ®¸nh dÊu ®Ó xem c¸c lùa chän cã s½n
5. KÝch vµo c¸c vßng trßn chän ®äc ë mÊy b­íc sãng..
6. §¸nh b­íc sãng hoÆc kÐo liÖt kª ®Ó chän b­íc sãng.
7. KÝch vµo Validate: Gen5 chÊp nhËn quy tr×nh khi ®ãng vµ ghi l¹i mµn
h×nh Procedure. NÕu kh«ng chÊp nhËn, phÇn mÒm hiÓn thÞ b­íc sai sãt
8. KÝch OK.
2. X¸c ®Þnh vÞ trÝ mÉu trªn khay
X¸c ®Þnh sè giÕng vµ nång ®é chuÈn ®· biÕt ®Ó vÏ ®­êng cong chuÈn, x¸c ®Þnh
giÕng ®Ó tr¾ng, x¸c ®Þnh c¸c giÕng cho mÉu chøng vµ mÉu kiÓm tra:
1. KÝch ®óp vµo Plate Layout
2. Trong hép Well settings ë gãc tr¸i bªn trªn, vÒ lo¹i mÉu (Type), chän
Standards
3. KÝch vµo hép cã 3 chÊm ®Ó nhËp nång ®é chuÈn.
1. NhËp nång ®é chuÈn ®Çu tiªn.
2. NÕu nång ®é t¨ng ®Òu, nhËp sè t¨ng vµo hép Incl
3. TiÕp tôc nhËp c¸c nång ®é chuÈn cßn l¹i..
4. KÝch OK.
4. G¾n c¸c giÕng chuÈn vµo trong khay:
1. T¨ng lÆp l¹i (Replicates) giÕng lªn 2 vµ chän Auto Select vµ chän
tuú ý Next Conc (nång ®é tiÕp theo)
2. Gi÷ vµ di chuét tõ giÕng ®Çu ®Õn giÕng cuèi cho hÕt nång ®é
chuÈn.
5. G¾n mÉu ®Ó tr¾ng vµo b¶n ®å khay:
1. §æi lo¹i giÕng (Type) sang (Blank), gi÷ lÆp l¹i ë 2
2. KÝch vµ th¶ giÕng A3 qua A4.
6. G¾n mÉu (Sample) kiÓm tra vµo b¶n ®å khay:
1. §æi lo¹i giÕng (Type) sang (Sample), gi÷ lÆp l¹i ë 2
2. Chän Auto Select vµ Next ID (Ph©n biÖt tiÕp theo)
3. KÝch vµ gi÷, kÐo, th¶ chuét qua c¸c giÕng cßn l¹i cho ®ñ sè mÉu
cÇn kiÓm tra.
7. KÝch OK ®Ó ®ãng vµ ghi nhí..
3. Cµi ®Æt sù rót gän sè liÖu (Data Reduction)
2
Sau khi ®· x¸c ®Þnh quy tr×nh vµ x¸c ®Þnh vÞ trÝ mÉu trªn khay, cã thÓ x¸c ®Þnh sù
rót gän sè liÖu. ViÖc tiÕp tôc nµy lµ b¾t buéc. Gen5 t¹o c¸c bé sè liÖu vµ ph©n biÖt
c¸c giÕng ®Ó sö dông trong tÝnh to¸n.
1. KÝch ®óp vµo Data Reduction
Gen5 tù ®éng trõ Blank
2. KÝch vµo Curve Analysis (Ph©n tÝch ®­êng cong) ®Ó thªm b­íc rót gän
sè liÖu kh¸c.
1. KÝch vµo Label (G¨n)®Ó thªm mét tªn ®éc nhÊt cho b­íc nµy;
ThÝ dô ®¸nh vµo Curve 450
2. Trªn thÎ Data In, rµ b¶n liÖt kª ®Ó chän trôc (Y-Axis). Data:
Blank 450.
3. Chän trªn thÎ Data Out, trong Data Set Name thªm 450 vµo tªn
®Æt sè liÖu nång ®é míi: Conc450.
4. KÝch OK ®Ó ghi nhí vµ ®ãng b­íc nµy.
3. Thªm nhiÒu b­íc Curve Analysis (Ph©n tÝch ®­êng cong) cho c¸c b­íc
sãng kh¸c: LÆp l¹i 4 b­íc trªn víi riªng tõng b­íc sãng.
4. KÝch vµo thÎ ng­ìng (Cutoff)
1. T¹i Data In chän bé sè liÖu: ThÝ dô Conc 450
2. NhËp vµo c«ng thøc ng­ìng thø nhÊt (Cutoff Formula 1):
ThÝ dô 10.
3. NhËp ký hiÖu (Symbols) vµo d¶i dßng ®Çu tiªn: ThÝ dô: Neg (cã
nghÜa lµ c¸c giÕng cã trÞ sè nhá h¬n 10 ®­îc ®¸nh gi¸ lµ ©m tÝnh)
4. NhËp ký hiÖu (Symbols) vµo d¶i dßng thø hai: ThÝ dô: OK (cã
nghÜa lµ c¸c giÕng cã trÞ sè lín h¬n 10 nh­ng nhá h¬n 50 vÉn
®­îc ®¸nh gi¸ lµ ©m tÝnh).
5. NhËp vµo c«ng thøc ng­ìng thø hai (Cutoff Formula 2):
ThÝ dô: 50.
6. NhËp ký hiÖu (Symbols) vµo d¶i dßng thø ba: ThÝ dô: Pos
(cã nghÜa lµ c¸c giÕng cã trÞ sè lín h¬n 50 ®­îc ®¸nh gi¸ lµ
d­¬ng tÝnh)
7. KÝch OK ®Ó ghi nhí vµ ®ãng b­íc nµy
5. KÝch vµo c¸c ®iÒu kiÖn hîp thøc (Validation)
1.T¹i thÎ Data In chän bé sè liÖu: ThÝ dô: Blank450
2. NhËp c«ng thøc, thÝ dô nh­: STD1>0.5 vµ 1.5<STD4<3.00
Cã nghÜa lµ trÞ sè STD ®o ®­îc ph¶i lín h¬n 0.5 vµ trÞ sè STD4
®o ®­îc ph¶i n»m gi÷a 1.500 vµ 3.00.
3. KÝch OK ®Ó ghi nhí vµ ®ãng b­íc nµy
6. KÝch OK ®Ó ghi nhí vµ ®ãng hép tho¹i rót gän sè liÖu.
4. Chän lùa néi dung b¸o c¸o
Lµm viÖc víi c©y th­ môc, ®· x¸c ®Þnh quy tr×nh, vÞ trÝ mÉu trªn khay vµ rót gän
sè liÖu. C¸c nh¾c nhë vÒ c¸c lÇn ®äc, c¸c th«ng tin do ng­êi sö dông nhËp khi thùc
hiÖn ®äc khay, cã thÓ t¹o ®Î x¸c ®Þnh trong ch­¬ng tr×nh c¸c thñ tôc ®· s¾p xÕp
tr­íc (Default Protocol), bëi v× chóng cã thÓ tån t¹i vµ dïng chung cho viÖc ®äc c¸c
xÐt nghiÖm kh¸c. trong Gen5, Reprt Builder vµ File Export Builder lµ hai phÇn kh¸c
nhau cho ®Çu ra, giÊy hoÆc file tµi liÖu.
1. KÝch ®óp vµo Reprt Builder.
2. KÝch ®óp vµo c¸c môc ®i theo trong “Xem sè liÖu liÖt kª cã s½n”
(Available Data Views) ®Ó Ên ®Þnh néi dung b¸o c¸o (Report Content).
3
– ChÊt nÒn: Blank 405
– ChÊt nÒn: Blank 450
– ChÊt nÒn: Blank 490
– Thèng kª: Blank 405
– Thèng kª Blank 450
– Thèng kª Blank 490
3. Thªm nhiÒu môc vµo néi dung b¸o c¸o:
– ChÊt nÒn: Ký hiÖu (Conc450)
– TrÞ sè ng­ìng: Cutoff (Conc450)
– Hîp thøc: Validation (Blank450)
– KÕt qu¶ ®­êng cong: c¸c kÕt qu¶ phï hîp ®­êng cong Curve405
– KÕt qu¶ ®­êng cong: c¸c kÕt qu¶ phï hîp ®­êng cong Curve450
– KÕt qu¶ ®­êng cong: c¸c kÕt qu¶ phï hîp ®­êng cong Curve490
4. KÝch, kÐo th¶ tõng ®­êng cong d­íi Standard/Titer Curve vµo trong
Report Content.
5. KÝch vµ kÐo th¶ Field group ë cuèi b¶n liÖt kª vµo phÝa trªn cïng néi
dung b¸o c¸o.
6. KÝch ®óp vµo Field Group ®Ó chän:
1 Chän dßng 1 (di chuét qua 1 cho ®Õn lóc nã thay ®æi mòi tªn bªn
tr¸i vµ kÝch chuét), kÝch chuét ph¶i vµ chän Merge Row.
2 KÝch chuét ®Ó hiÖn « cã 3 chÊm vµ kÝch vµo « 3 chÊm
3 Trong hép tho¹i Field ®Æt Category vµo Text
4 KÝch vµ th¶ vµo Label ®Ó ®¸nh tiªu ®Ò b¸o c¸o. Khi kÕt thóc, kÝch
chuét ë bªn ngoµi hép tho¹i.
5 Trong Font, kÝch vµo 3 chÊm ®Ó thay ®æi ph«ng ch÷
6 Trë l¹i hép tho¹i Field, kÝch vµo « ë cét 1, dßng 2 vµ kÝch vµo 3
chÊm ®Ó nhËp tiÕp
7 §Æt Category ®Õn Plate information (c¸c th«ng tin vÒ khay) vµ
chän Reading Date/Time (thêi gian thùc hiÖn ®äc). KÝch vµo OK
®Ó ®ãng mµn h×nh Field
8 §ãng vµ ghi nhí c¸c cµi ®Æt vÒ b¸o c¸o
Ghi nhí
8. KÝch vµo hép Save hoÆc chän File>Save vµ nhËp vµo tªn ®éc nhÊt
Sau khi lËp xong, ch¹y xÐt nghiÖm nµy ë Experiment
Thùc hiÖn xÐt nghiÖm
C¸c b­íc:
1 Chän File>New experiment
2 Chän mét xÐt nghiÖm ®· lËp
3 KÝch chuét vµo biÓu t­îng Read
4 KÝch chuét vµo Read from File hoÆc mÉu ®­îc cung cÊp víi Gen5
5 Theo ®­êng dÉn t×m file vµ kÝch Open
Xem kÕt qu¶ vµ b¸o c¸o
6 T×m ë b¶n liÖt kª ®Ó hiÖn kÕt qu¶ xÐt nghiÖm
7 Chän c¸c b¶ng kh¸c ®Ó xem sè liÖu
8 KÝch vµo Print Preview ®Ó xem tr­íc khi in ra
9 NÕu ­ng ý, kÝch vµo Print ®Ó in ra

Quy trình vận hành tiêu chuẩn của Hệ thống HPLC bằng phần mềm Chemistation Software. – SOP

Hệ thống lên men proSET Evo (Hệ thống bioreactor)

Hệ thống hình ảnh hóa chất phát quang chemiLITE